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人Ph+急淋白血病細胞系

 一.人Ph+急淋白血病細胞產品簡介

1、細胞名稱:Sup-b15;人Ph+急淋白血病細胞
2、生長特性: 懸浮 
3、人Ph+急淋白血病細胞生長條件:
培養條件  IMDM+20%FBS+1%P/S
溫度  37℃
空氣條件  5% CO2,,95% AIR
傳代方法  首次建議1:2傳代,2~3天換液
凍存條件  90%FBS+10%DMSO
二.人Ph+急淋白血病細胞使用方法
1、您收到人Ph+急淋白血病細胞后,請按照以下方法進行操作:
取出細胞培養瓶,75%酒精擦拭培養瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細胞培養箱中靜置2-3小時以穩定細胞狀態,然后離心換用新鮮完全培養液繼續培養或進行傳代。
人Ph+急淋白血病細胞達到一定密度(不超過1x10^6/ml)可按照以下方法換液培養或傳代。
方法①:收集細胞,1000rpm離心5min,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法②:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
貼壁細胞需要用胰酶進行消化。
1)將細胞懸液轉移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;
2)用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細胞,并放置于凍存管中;
3)先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉入液氮中進行長期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。
1)從液氮中取出細胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具),快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2)將凍存管中的細胞移至含10ml完全培養基的15ml離心管中, 1000rpm離心5min;
3)棄上清,沉淀用5ml完全培養基重懸,接種25cm2培養瓶,于37℃,5%CO2細胞培養箱中培養;
4)第二天,換用新鮮完全培養基繼續培養。
注:培養瓶內非完全培養基,請務必使用準備好的新鮮培養基。懸浮細胞運輸中會有少些細胞因為碰撞裂解產生碎片,收到細胞如碎片較多時,胎牛血清可以用15%培養三天,利于細胞盡快恢復狀態,細胞穩定后再調回10%即可。