一、 兔骨髓間充質干細胞 產品簡介 

1. 產品名稱：兔骨髓間充質干細胞 

2. 組織來源：骨髓 

3. 產品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 

4. 細胞簡介： 

兔骨髓間充質干細胞（BMSC）分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質間的網眼中，是一種海綿狀的組織，能產生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代，最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓基質系統(tǒng)內存在的骨髓間充質干細胞是一種除造血干細胞以外的、具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細胞，可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經等多種組織分化，因此可以作為組織工程中的種子細胞。在骨髓中，BMSC占骨髓有核細胞總數的0.001%-0.1%，含量極低。骨髓間充質干細胞的體外培養(yǎng)條件要求較高，在培養(yǎng)過程中，受貼壁時間、種植密度、血清含量、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)基pH值等條件的影響。 

本公司生產的兔骨髓間充質干細胞采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結合培養(yǎng)基篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶；細胞經CD90/CD44、CD34/CD45免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 

5. 培養(yǎng)基信息： 

DMEM-F12、FBS、間充質干細胞生長添加劑、Glutamine、Penicillin、Streptomycin等 

我們推薦使用兔骨髓間充質干細胞專用完全培養(yǎng)基作為體外培養(yǎng)兔骨髓間充質干細胞的培養(yǎng)基。 

二、使用方法 

在技術部標準操作流程下，兔骨髓間充質干細胞可傳3-5代左右，隨著傳代次數的增加，細胞會呈現老化狀態(tài)，生長速度減緩，3代以內細胞狀態(tài)最佳；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。 

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。 

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。 

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。 

 3. 細胞傳代 

1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次； 

2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化； 

3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2-1:3適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)； 

4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。 

三、注意事項 

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。 

2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。 

3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。 

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術部溝通；由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。 

5. 該細胞只可用于科研。  

備注：由于實驗所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同，以上方法僅供各實驗室參考